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编号:13211672
补肾清肝中药配伍对间歇性低氧诱导人脐静脉内皮细胞损伤模型p38MAPK/NF—κB信号通路的干预效应研究(2)
http://www.100md.com 2017年12月1日 中国中药杂志 2017年第23期
     1 材料与方法

    1.1 药物 中药钩藤的有效成分异钩藤碱(批号111927-201403)、中药杜仲的有效成分桃叶珊瑚苷(批号111761-200601)、中药川芎的有效成分川芎嗪(批号110817-201307)均由中国食品药品检定研究院提供。

    1.2 细胞来源 人脐静脉内皮细胞(HUVECs)由健康产妇、正常分娩12 h内脐带的脐静脉分离提取(脐带由中日友好医院妇产科提供)。

    1.3 HUVECs的分离及培养 无菌条件下取健康产妇、正常分娩12 h内脐带20~30 cm,PBS冲洗脐带并去除两端,镊子扩张静脉腔,插入三通管并固定。三通管另一端连接针头后插入倒置的PBS瓶中,抽推进器使PBS流入针筒,关闭此开关阀后推推进器使PBS流入脐带,注意防止气泡。以上操作清洗脐带2~3次直至无肉眼可见血色。脐带末端插入带有胶皮管的针头,重复清洗1次后,将连接三通管针头插入0.1%胶原酶溶液瓶中,倒置酶瓶后抽推进器使酶液流入针管 ......
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