基于COI与SRY序列建立梅花鹿、马鹿及其杂交鹿茸的分子鉴别方法(2)
1 材料1.1 仪器 微量分光光度计(Nanodrop 2000,Thermo Scientific 公司); Veriti PCR仪 (Applied Biosystems),5810R 型低温冷冻离心( Eppendorf公司),ND-100型核酸蛋白分析仪(Gene 公司),DDZ-11型电池式电动骨钻(上海医疗器械集团) 。
1.2 试剂及样品 TIANDZ柱式骨骼DNAout购自北京天恩泽公司;DL 2 000 plus DNA Marker购自Takara 公司;多重PCR 5×Master Mix购自NEB公司,FastTaq DNA聚合酶购自TransGen公司。三氯甲烷购自北京化工厂,均为国产分析纯。鹿茸药材包括马鹿、梅花鹿及其混伪品,共计48个样品,分别购自新疆、吉林、安徽、湖南、重慶、广西、云南、北京、广州等地,样品由金艳鉴定,药材标本保存于中国中医科学院中药资源中心,见表1。
2 方法
2.1 基因组DNA的提取和纯化 取药材样品,经过75%乙醇表面消毒后 ......
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