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编号:13009645
三七总皂苷联合淫羊藿总黄酮改善D—gal致H9c2大鼠心肌细胞衰老的保护作用(3)
http://www.100md.com 2017年2月1日 《中国中药杂志》 2017年第3期
     2.4 DCFH-DA探针法检测H9c2大鼠心肌细胞内ROS荧光强度 H9c2大鼠心肌细胞悬液以1×105 个/mL接种于24孔板中,每孔1 mL,分组同2.3项下,每孔设置6个复孔,作用24 h后,弃去上清液,加入1 mL,10 μmol·L-1的DCFA-DA溶液,将其放入37 ℃恒温箱中孵育1 h,用不含FBS的DMEM小心地将细胞清洗3遍,倒置荧光显微镜(100倍,视野50 μm)下观察荧光强度。

    2.5 JC-1检测H9c2大鼠心肌细胞线粒体膜电位水平 H9c2大鼠心肌细胞悬液以1×105 个/mL接种于24孔板中,每孔1 mL,分组同2.3项下,每孔设置6个复孔,作用24 h后,弃去上清液,加入JC-1染色工作液,在37 ℃恒温相中孵育20 min后终止孵育,弃去工作液,用JC-1染色缓冲液清洗2遍后,弃去缓冲液,第3遍加入JC-1染色缓冲液 ......
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