地稔中黄酮及其苷类化学成分研究(1)
[摘要]利用常规柱色谱及高效液相色谱等技术对地稔95%乙醇提取物进行化学成分的分离纯化，从中分离得到13个化合物，根据其理化性质以及NMR和MS等光谱数据鉴定了结构，它们分别是槲皮素(1)、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷(2)、槲皮素-3-O-(6″-O-反式香豆酰基)-β-D-葡萄糖苷(3)、山柰酚(4)、山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷(5)、山柰酚-3-O-[2″，6″-O-双反式对香豆酰基]-β-D-吡喃葡萄糖苷(6)、木犀草素(7)、木犀草素-7-O-(6″-对-香豆酰基)-β-D-吡喃葡萄糖苷(8)、芹菜素(9)、芹菜素-7-O-β-D-(6″-O-乙酰基)-葡萄糖苷(10)、柚皮素(11)、异牡荆素(12)、表儿茶素-[8，7-e] -4β(4-羟基苯)-3，4-二羟基-2(3H)-吡喃酮(13)。化合物3，5，6，8～11和13等8个化合物为首次从地稔中分离得到。
[关键词]地稔；黄酮；黄酮苷类
地稔Melastoma dodecandrum Lour.为野牡丹科草本植物地稔的全草，又名山地稔、地葡萄、金头石榴、铺地锦、落地稔、地茄等[1]。其全草药用，味甘、涩、性凉，具有活血止血、消肿去瘀、清热解毒之功效，临床上用于治疗高热、肿痛、咽喉肿痛、牙痛、赤白血痢疾、黄疽、水肿、痛经、崩漏、带下、痔疮、毒蛇咬伤等病症[2]。另外有报道地稔有抗肿瘤、抗衰老、降血糖、降血脂等作用，而对正常细胞没有毒副作用[3-4]。
, 百拇医药
地稔的植物资源丰富，但目前为止，对其化学成分的研究仍然较少。为了更好地认识其内在物质基础和药效成分，本实验对地稔的化学成分进行了进一步的研究，从地稔95%乙醇提取物所得的乙酸乙酯萃取部位中分离鉴定出13个化合物，它们分别为槲皮素(1)、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷(2)、槲皮素-3-O-(6″-O-反式香豆酰基)-β-D-葡萄糖苷(3)、山柰酚(4)、山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷(5)、山柰酚-3-O-[2″，6″-O-双反式对香豆酰基]-β-D-吡喃葡萄糖苷(6)、木犀草素(7)、木犀草素-7-O-(6″-对-香豆酰基)-β-D-吡喃葡萄糖苷(8)、芹菜素(9)、芹菜素-7-O-β-D-(6″-O-乙酰基)-葡萄糖苷(10)、柚皮素(11)、异牡荆素(12)、表儿茶素-[8，7-e]-4β(4-羟基苯)-3，4-二羟基-2(3H)-吡喃酮(13)。
1 材料
EYELA(n-1000)旋转蒸发仪；AV-300 MHz超导核磁共振仪(德国Bruker公司)；Finnigan LCQ Adantage MAX 质谱仪；Agilent 1200 型液相分析色谱仪；Agilent 1200 型液相半制备色谱仪；Welch Material XB-C18分析色谱柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)；Welch Material XB-C18半制备色谱柱(10 mm×250 mm，5 μm)；凝胶Sephadex LH-20(Pharmacia公司)；薄层色谱硅胶预涂板(HSAF254，200 mm×200 mm，烟台市化学工业研究所产品)；ODS(50 mm，YMC，日本东京Merck公司)；柱色谱硅胶(青岛海洋化工厂分厂)；溶剂均为分析纯或色谱纯。
, http://www.100md.com
实验用药材于2013年5月采自广东省从化市，经暨南大学生药学教研室周光雄教授鉴定为野牡丹科植物地稔M. dodecandrum(No. 2011DC2013)的全草，该药材存放在暨南大学药学院生药教研室。
2 分离和纯化
地稔全草30 kg粉碎，用95%乙醇回流提取3次。提取液减压浓缩后得粗浸膏1 210 g，用适量水混悬，依次用石油醚、乙酸乙酯萃取，分别得到石油醚萃取物(430 g)、乙酸乙酯萃取物(148 g)。
将乙酸乙酯部位经硅胶柱色谱，以氯仿-甲醇(100∶0～0∶100)系统梯度洗脱，经TLC色谱分析后合并浓缩，得到9个组分(A1～A9)。组分A2继续经硅胶柱色谱，以氯仿-丙酮(100∶0～0∶100)系统梯度洗脱，TLC检测合并后得到6个组分(A2B～A2G)，组分A2B组分经过重结晶得到化合物12(510 mg)，组分A2C经过硅胶柱石油醚-乙酸乙酯(20∶1)系统洗脱，得到的子馏分经Sephadex LH-20凝胶柱色谱得到化合物11(22 mg)，9(51 mg)和7(25 mg)。组分A4经过反相ODS开放柱色谱，以甲醇-水(3∶7～10∶0)系统梯度洗脱，得到的各组分经Sephadex LH-20凝胶柱色谱，以氯仿-甲醇(1∶1)系统洗脱，得到化合物13(6 mg)，10(11 mg)和1(11 mg)。组分A6经反相ODS开放柱色谱及Sephadex LH-20凝胶柱色谱，得到化合物6(51 mg)和4(6 mg)，用甲醇重结晶得到化合物5(140 mg)和8(6 mg)。组分A7经过反相ODS开放柱色谱，得到的各组分再经过Sephadex LH-20凝胶柱色谱及半制备-HPLC(40%甲醇)，得到化合物2(99 mg)和3(40 mg)。
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3 结构鉴定
化合物1黄色粉末(甲醇)，ESI-MS m/z 303[M+H]+。1H-NMR(DMSO-d6，300 MHz) δ： 12.50(1H，s，5-OH)，10.79(1H，s，7-OH)，9.61(1H，s，4′-OH)，7.68(1H，d，J=2.0，H-2′)，7.54(1H，dd，J=8.5，2.0 Hz，H-6′)，6.88(1H，d，J=8.5 Hz，H-5′)，6.41(1H，d，J=1.7 Hz，H-8)，6.19(1H，d，J=1.7 Hz，H-6)；13C-NMR(DMSO-d6，75 MHz) δ： 146.8(C-2)，135.8(C-3)，175.9(C-4)，160.8(C-5)，98.2(C-6)，163.9(C-7)，93.4(C-8)，156.2(C-9)，103.1(C-10)，122.0(C-1′)，115.1(C-2′)，145.1(C-3′)，147.7(C-4′)，115.7(C-5′)，120.0(C-6′)。以上波谱数据与文献[5]报道一致，鉴定其为槲皮素。, 百拇医药(程淼 孟令杰 周兴栋 邹惠亮 余绍福 周光雄)
[关键词]地稔；黄酮；黄酮苷类
地稔Melastoma dodecandrum Lour.为野牡丹科草本植物地稔的全草，又名山地稔、地葡萄、金头石榴、铺地锦、落地稔、地茄等[1]。其全草药用，味甘、涩、性凉，具有活血止血、消肿去瘀、清热解毒之功效，临床上用于治疗高热、肿痛、咽喉肿痛、牙痛、赤白血痢疾、黄疽、水肿、痛经、崩漏、带下、痔疮、毒蛇咬伤等病症[2]。另外有报道地稔有抗肿瘤、抗衰老、降血糖、降血脂等作用，而对正常细胞没有毒副作用[3-4]。
, 百拇医药
地稔的植物资源丰富，但目前为止，对其化学成分的研究仍然较少。为了更好地认识其内在物质基础和药效成分，本实验对地稔的化学成分进行了进一步的研究，从地稔95%乙醇提取物所得的乙酸乙酯萃取部位中分离鉴定出13个化合物，它们分别为槲皮素(1)、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷(2)、槲皮素-3-O-(6″-O-反式香豆酰基)-β-D-葡萄糖苷(3)、山柰酚(4)、山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷(5)、山柰酚-3-O-[2″，6″-O-双反式对香豆酰基]-β-D-吡喃葡萄糖苷(6)、木犀草素(7)、木犀草素-7-O-(6″-对-香豆酰基)-β-D-吡喃葡萄糖苷(8)、芹菜素(9)、芹菜素-7-O-β-D-(6″-O-乙酰基)-葡萄糖苷(10)、柚皮素(11)、异牡荆素(12)、表儿茶素-[8，7-e]-4β(4-羟基苯)-3，4-二羟基-2(3H)-吡喃酮(13)。
1 材料
EYELA(n-1000)旋转蒸发仪；AV-300 MHz超导核磁共振仪(德国Bruker公司)；Finnigan LCQ Adantage MAX 质谱仪；Agilent 1200 型液相分析色谱仪；Agilent 1200 型液相半制备色谱仪；Welch Material XB-C18分析色谱柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)；Welch Material XB-C18半制备色谱柱(10 mm×250 mm，5 μm)；凝胶Sephadex LH-20(Pharmacia公司)；薄层色谱硅胶预涂板(HSAF254，200 mm×200 mm，烟台市化学工业研究所产品)；ODS(50 mm，YMC，日本东京Merck公司)；柱色谱硅胶(青岛海洋化工厂分厂)；溶剂均为分析纯或色谱纯。
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实验用药材于2013年5月采自广东省从化市，经暨南大学生药学教研室周光雄教授鉴定为野牡丹科植物地稔M. dodecandrum(No. 2011DC2013)的全草，该药材存放在暨南大学药学院生药教研室。
2 分离和纯化
地稔全草30 kg粉碎，用95%乙醇回流提取3次。提取液减压浓缩后得粗浸膏1 210 g，用适量水混悬，依次用石油醚、乙酸乙酯萃取，分别得到石油醚萃取物(430 g)、乙酸乙酯萃取物(148 g)。
将乙酸乙酯部位经硅胶柱色谱，以氯仿-甲醇(100∶0～0∶100)系统梯度洗脱，经TLC色谱分析后合并浓缩，得到9个组分(A1～A9)。组分A2继续经硅胶柱色谱，以氯仿-丙酮(100∶0～0∶100)系统梯度洗脱，TLC检测合并后得到6个组分(A2B～A2G)，组分A2B组分经过重结晶得到化合物12(510 mg)，组分A2C经过硅胶柱石油醚-乙酸乙酯(20∶1)系统洗脱，得到的子馏分经Sephadex LH-20凝胶柱色谱得到化合物11(22 mg)，9(51 mg)和7(25 mg)。组分A4经过反相ODS开放柱色谱，以甲醇-水(3∶7～10∶0)系统梯度洗脱，得到的各组分经Sephadex LH-20凝胶柱色谱，以氯仿-甲醇(1∶1)系统洗脱，得到化合物13(6 mg)，10(11 mg)和1(11 mg)。组分A6经反相ODS开放柱色谱及Sephadex LH-20凝胶柱色谱，得到化合物6(51 mg)和4(6 mg)，用甲醇重结晶得到化合物5(140 mg)和8(6 mg)。组分A7经过反相ODS开放柱色谱，得到的各组分再经过Sephadex LH-20凝胶柱色谱及半制备-HPLC(40%甲醇)，得到化合物2(99 mg)和3(40 mg)。
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3 结构鉴定
化合物1黄色粉末(甲醇)，ESI-MS m/z 303[M+H]+。1H-NMR(DMSO-d6，300 MHz) δ： 12.50(1H，s，5-OH)，10.79(1H，s，7-OH)，9.61(1H，s，4′-OH)，7.68(1H，d，J=2.0，H-2′)，7.54(1H，dd，J=8.5，2.0 Hz，H-6′)，6.88(1H，d，J=8.5 Hz，H-5′)，6.41(1H，d，J=1.7 Hz，H-8)，6.19(1H，d，J=1.7 Hz，H-6)；13C-NMR(DMSO-d6，75 MHz) δ： 146.8(C-2)，135.8(C-3)，175.9(C-4)，160.8(C-5)，98.2(C-6)，163.9(C-7)，93.4(C-8)，156.2(C-9)，103.1(C-10)，122.0(C-1′)，115.1(C-2′)，145.1(C-3′)，147.7(C-4′)，115.7(C-5′)，120.0(C-6′)。以上波谱数据与文献[5]报道一致，鉴定其为槲皮素。, 百拇医药(程淼 孟令杰 周兴栋 邹惠亮 余绍福 周光雄)