2.5 毛状根生长曲线和东莨菪碱、莨菪碱生物合成动态曲线的建立

    选取1个生长迅速的白花曼陀罗毛状根单克隆，固体扩大培养后，分别准确定量接种约0.2 g于21个150 mL的1/2MS液体培养基中培养后，每隔5 d，任意取出3个毛状根培养物，滤纸吸干毛状根表面的水分后测量鲜重，真空冷冻干燥8 h后称量干重，并检测毛状根中东莨菪碱和莨菪碱含量，建立毛状根生长曲线及东莨菪碱和莨菪碱的动态合成曲线。

    2.6 白花曼陀罗毛状根中东莨菪碱和莨菪碱的提取

    选取10个不同的毛状根单克隆分别接种于150 mL的1/2MS液体培养基中，依据生长曲线，当毛状根生长处于生长停滞期后，取出毛状根进行东莨菪碱和莨菪碱的含量测定。东莨菪碱和莨菪碱的提取方法参照^[9]。分别准确称取不同的毛状根系约0.1 g，置具塞锥形瓶中，准确加入浓氨水-乙醇-乙醚(4∶5∶10)溶液9.5 mL，摇匀、密塞，室温放置12 h，常温下超声(100 W)提取2次，每次30 min，1万r·min^-1离心5 min ......